Η Polymerase Chain Reaction , PCR ή , είναι μια τεχνική που χρησιμοποιείται για να κάνει αντίγραφα του DNA . Συγκεκριμένα , η PCR χρησιμοποιεί ένα ένζυμο που είναι γνωστό ως μια πολυμεράση , η οποία προσθέτει μεμονωμένες βάσεις DNA σε μία αναπτυσσόμενη αλυσίδα του DNA. Η αντίδραση PCR εξαρτάται από τους εκκινητές , σύντομη κλώνους του DNA η πολυμεράση πρέπει να αρχίσει την αναπαραγωγή του DNA , και η μήτρα εκκινητή, ένα μίγμα των αντιδραστηρίων και των ίδιων εκκινητών. Κάθε αντίδραση PCR θα πρέπει να είναι ένας συνολικός όγκος δεν υπερβαίνει τα 50 uL.Things Θα πρέπει
10x PCR Buffer
2 mM dNTP
εκκινητών 50pmol
25mM MgCl2
1 pmol πρότυπο DNA
Καθαρό νερό
Eppendorf σωλήνες
Εμφάνιση Περισσότερες οδηγίες
Η 1
Προσθέστε 2,5 μι του ρυθμιστικού PCR σε ένα σωλήνα Eppendorf , καθώς και 2,5 μλ των dNTPs .
2
Προσθέστε 2 μλ ( 50 pmol ) των εκκινητών σε σωλήνα Eppendorf και 1 μλ MgCl2 .
εικόνων 3
Προσθέστε νερό ώστε να φθάσουν σε τελικό όγκο 50 υί . Προσθέστε 1 pmol του DNA εκμαγείου , ή 1 uL του διαλύματος DNA, όποιο από τα δύο είναι ευκολότερο να μετρηθεί. Αστάρι μήτρα σας είναι έτοιμη .
Η 4
Επαναλάβετε τα βήματα 1 έως 3 για όσες μήτρες όπως θέλετε να προετοιμάσει εικόνων
.
