Πώς να μειωθεί η μη - ειδική δέσμευση σε Εμπορευματοκιβώτια

σε μία ανοσοδοκιμασία η δεσμευτική ικανότητα σε ένα δοχείο ή σε φρεάτια της μικροπλάκας είναι υψηλότερη από την ποσότητα της πρωτεΐνης που τοποθετείται μέσα στο δοχείο ή πηγάδια. Να μειώσουν ή να αποτρέψουν αντισώματα ή άλλους τύπους πρωτεϊνών και μορίων από την απορρόφηση στο δοχείο ή πηγάδια , η δοκιμασία θα πρέπει να πλένονται με το κατάλληλο ρυθμιστικό διάλυμα και ένα ειδικό αντιδραστήριο μπλοκαρίσματος πρέπει να προστεθεί . Ο τύπος του ρυθμιστικού και το αντιδραστήριο δέσμευσης που επιλέγεται εξαρτάται από τον τύπο των πειραματικών assay.Things Θα πρέπει
πηγάδια Plate
Ρυθμιστικό διάλυμα
Μπλόκο αντιδραστηρίου
τη βοήθεια σιφωνίου
Antigen
αντισωμάτων

Εμφάνιση MoreInstructions
Η 1

Καλύψτε τα φρεάτια της πλάκας με το αντιγόνο . Χρησιμοποιήστε μια αραίωση του αντιγόνου . Καθαρά διαλύματα του αντιγόνου δεν απαιτούνται , δεδομένου ότι μόνο περίπου 3 τοις εκατό της πρωτεΐνης στο δείγμα είναι η πρωτεΐνη-στόχος . Κατά την αραίωση , εξασφαλίζει ότι τα δείγματα περιέχουν το αντιγόνο σε μία συγκέντρωση που είναι εντός του εύρους ανίχνευσης του αντισώματος . Περάστε τον διάλυμα αραίωσης αντιγόνου κάτω από τα φρεάτια της πλάκας . Ορισμένες πλάκες μπορούν να είναι προ- επικαλυμμένα με αντιγόνο. Διαβάστε τις οδηγίες που παρέχονται με τα φρεάτια της πλάκας . 2

Καλύψτε τις πλάκες με ένα αυτοκόλλητο πλαστικό και επώαση όλη τη νύκτα . Πλένουμε τις πλάκες με ρυθμιστικά διαλύματα , όπως Tris - ρυθμισμένο αλατούχο διάλυμα ή αλατούχο φωσφορικό ρυθμιστικό διάλυμα . Για να πλύνετε , ξεπλύνετε τα πιάτα χρησιμοποιώντας μια συμπίεση μπουκάλι γεμάτο με το ρυθμιστικό διάλυμα σε ένα εργαστήριο νεροχύτη . Pat οι πλάκες με μία χάρτινη πετσέτα για να αφαιρέσετε τυχόν εναπομείναντα σταγόνες ρυθμιστικού διαλύματος .
Εικόνων 3

Μείωση της μη ειδικής δέσμευσης των πρωτεϊνών και μορίων χρησιμοποιώντας ένα ρυθμιστικό διάλυμα αποκλεισμού ή αντιδραστήριο , όπως ένα απορρυπαντικό blocker , ξηρό γάλα ή ορό βοοειδούς. Ο τύπος του αποκλεισμού αντιδραστηρίου που χρησιμοποιείται θα εξαρτηθεί από τη δοκιμασία . Προσθέστε το αντιδραστήριο μπλοκαρίσματος στα φρεάτια χρησιμοποιώντας μία πιπέτα . Καλύψτε την πλάκα και πάλι με αυτοκόλλητο πλαστικό και επώαση όλη τη νύκτα .
Η 4

Re - πλύνετε τα φρεάτια της πλάκας και πάλι χρησιμοποιώντας ένα ρυθμιστικό διάλυμα . Αυτά τα βήματα θα μειώσει την ποσότητα της μη ειδικής δέσμευσης που μπορεί να συμβεί στα φρεάτια πλάκας πριν την προσθήκη του διαλύματος αντισώματος απαραίτητη για τη διαδικασία . Επιπλέον , τα αντιδραστήρια φραγμού μπορεί να βοηθήσει να μειώσει το χρώμα του φόντου στα αποτελέσματα των δοκιμασιών .
Η
εικόνων