Βασική δραστηριότητα του Διοργανωτή SP6

In vitro πειράματα είναι εκείνα που πραγματοποιούνται έξω από ένα ζωντανό οργανισμό σε ένα δοκιμαστικό σωλήνα ή παρόμοιο περιβάλλον . Επιστήμονες μπορούν να κάνουν αντίγραφα RNA ή μεταγραφές ενός γονιδίου ίη vitro μέσω μιας διαδικασίας που ονομάζεται ίη vitro μεταγραφή. Το ένζυμο που κάνει το μεταγράφημα RNA με βάση το γονίδιο ονομάζεται RNA πολυμεράση . Ένα τέτοιο μόριο είναι η πολυμεράση SP6 . Απαιτεί ένα τμήμα του DNA που ονομάζεται τον υποκινητή SP6 , προκειμένου να λειτουργήσει σωστά. Οι υποψήφιοι
Η

Ένας προαγωγός είναι η περιοχή του DNA που δεσμεύεται με πολυμεράση RNA για την έναρξη της μεταγραφής . Ο SP6 πολυμεράση απαιτεί ότι μια πολύ ειδική αλληλουχία είναι παρούσα στον προαγωγέα δεσμεύοντας , έτσι ώστε όταν το SP6 πολυμεράση χρησιμοποιείται για την in vitro μεταγραφή , το γονίδιο πρέπει να περιέχει τον υποκινητή SP6 για να συμβεί μεταγραφή . Η SP6 πολυμεράση είναι από ένα είδος ιού που ονομάζεται ένας βακτηριοφάγος ? βιοτεχνολογικές εταιρείες παράγουν αυτό πολυμεράσης με τη μόλυνση με βακτήρια της σαλμονέλας φάγων και στη συνέχεια απομόνωση της πολυμεράσης .
εικόνων Έκφραση
Η

Βασική έκφραση ή δραστηριότητα αναφέρεται στο επίπεδο της έκφρασης απουσία άλλα μόρια που θα αυξήσουν ή να μειώσουν το επίπεδο της μεταγραφής . Ενεργοποιητές ή καταστολείς, για παράδειγμα, είναι πρωτεΐνες που μπορούν να συνδέονται με τον υποκινητή ή σε άλλες ρυθμιστικές περιοχές των γονιδίων και είτε να βοηθήσει στην πρόσληψη της πολυμεράσης RNA ή την πρόληψη της πρόσδεσης . Επαγωγείς είναι μόρια που ενισχύουν την παραγωγή του προϊόντος γονιδίου αυξάνοντας τα επίπεδα έκφρασης .

Η SP6
Η

Βασική δραστηριότητα για τον υποκινητή SP6 θα ποικίλει ανάλογα με τις συνθήκες της το πείραμά σας . Το πιο σημαντικό , βέβαια , είναι το πώς πειραματικές συνθήκες μπορούν να επηρεάσουν τη δραστηριότητα και τον τρόπο SP6 συγκρίνεται με άλλα συστήματα . Σε γενικές γραμμές , SP6 πολυμεράση και υποστηρικτές προσφέρουν χαμηλότερη απόδοση από τις Τ7 ή Τ3 in vitro συστήματα μεταγραφής , αν και κάτω από ιδανικές συνθήκες SP6 είναι περίπου συγκρίσιμη με των άλλων δύο . Όπως SP6 , τόσο Τ7 και Τ3 χρησιμοποιούν μια πολυμεράση RNA από βακτηριοφάγο .
Εικόνων μετεωρολογικές

Η συγκέντρωση άλατος και η θερμοκρασία είναι δύο σημαντικοί παράγοντες για τον καθορισμό της βασικής δραστηριότητας . SP6 είναι πολύ ευαίσθητη στην συγκέντρωση άλατος , έτσι υψηλότερες συγκεντρώσεις άλατος μπορεί να μειώσει σε μεγάλο βαθμό τη δράση του. Όλα τα άλλα που παραμένουν ίσα , η έκφραση είναι σημαντικά μεγαλύτερη σε 104 βαθμούς Κελσίου από ό, τι στους 99 βαθμούς Κελσίου . Συγκέντρωση νουκλεοτιδίων είναι άλλο ένα σημαντικό ζήτημα . Οι χαμηλές συγκεντρώσεις μπορεί να προκαλέσει μεταγραφή να τερματίσει πρόωρα και έτσι να μειώσει την αποδοτικότητά σας . Αύξηση της συγκέντρωσης νουκλεοτιδίων θα αποφύγει αυτό το πρόβλημα. Εάν σύνθεση ανιχνευτών RNA , ωστόσο , προσθέτοντας πάρα πολύ μη σημασμένο νουκλεοτίδιο θα μειωθεί το ποσό της σημασμένο νουκλεοτίδιο στο τελικό προϊόν .
Η
εικόνων