Πώς να αυξηθεί Apicoplast κύτταρα ενός παρασίτου σε μια Πολιτισμός

Apicoplasts είναι ένα είδος ενδοκυτταρικό οργανίδιο παρούσα σε μονοκύτταρους παράσιτα που προκαλούν σοβαρές ασθένειες όπως η ελονοσία , η τοξοπλάσμωση και κοκκιδίωσης . Οργανίδια είναι πολύπλοκες δομές μέσα σε ένα κελί που δεν μπορούν να αναπτυχθούν και να αναπαραχθούν από μόνα τους . Θα προέκυψε όταν ένας πρόγονος των παρασίτων τυλίχθηκε άλλο οργανισμό , η οποία κατά πάσα πιθανότητα σχετίζεται με κόκκινα φύκια . Επειδή apicoplasts δεν είναι ανεξάρτητες κύτταρα , δεν μπορούν να αναπτυχθούν σε μία καλλιέργεια από μόνα τους. Για να αναπτυχθούν χρειάζεται να αυξηθούν τα παράσιτα . Αυτό που ακολουθεί είναι οι οδηγίες για τον πολιτισμό το κόκκινο στάδιο των κυττάρων του αίματος του Plasmodium falciparum , το οποίο προκαλεί malaria.Things Θα πρέπει
Parasite απόθεμα
RPMI 1640
στρωτή ροή κουκούλα
Αυτόκλειστο
Albumax II υποκατάστατο ορού
D - γλυκόζη
Hypoxantine
HEPES
γενταμικίνη θειική
φιάλες Πολιτισμός
κυττάρων θερμοκοιτίδα
ερυθρά αιμοσφαίρια

Παρουσίαση Περισσότερες οδηγίες
καλλιέργεια Plasmodium falciparum
Η

1 Ρυθμίστε το εκκολαπτήριο των κυττάρων έως 37 βαθμούς Κελσίου και να προσαρμόσει τη σύνθεση του αερίου έως 1 τοις εκατό του οξυγόνου , 3 τοις εκατό του διοξειδίου του άνθρακα , και 96 τοις εκατό του αζώτου . 2

Αυτόκαυσέ όλων των μη αποστειρωμένο εξοπλισμό και τα υλικά
εικόνων 3

Εργασία στην κουκούλα στρωτή ροή για τη διατήρηση της αποστείρωσης , να προετοιμάσει το τελικό μέσο με την ακόλουθη προσθήκη στο μέσο καλλιέργειας RPMI 1640 :

ϋ-γλυκόζη σε μία τελική συγκέντρωση 20 mM .

Hypoxantine σε μία τελική συγκέντρωση 0,2 mM.

HEPES σε μια τελική συγκέντρωση των 25 mM.
<ρ> γενταμικίνη θειική σε τελική συγκέντρωση 25 mg /L.

Albumax II σε τελική συγκέντρωση 0,5 τοις εκατό β /ο.
Η 4

Μοιράστε το συνολικό ποσό του μέσου γίνεται σε το προηγούμενο βήμα σε όσες φιάλες καλλιέργειας , όπως επιθυμούσε και να τα τοποθετήσετε στον αναδευτήρα στο εκκολαπτήριο.
5

Αφού το μέσο έχει φτάσει στους 37 βαθμούς Κελσίου , προσθέστε το ζωμό παράσιτο .
Η 6

Αλλάξτε το μέσο καλλιέργειας κάθε μέρα για να κρατήσει τα παράσιτα τρέφονται καλά και ζωντανός .
Η 7

Προσθήκη ερυθρά αιμοσφαίρια κάθε δεύτερη μέρα . Αυτοί θα μολυνθεί από τα νέα παράσιτα που να δημιουργούνται στην καλλιέργεια. Εάν γίνουν πάρα πολλά για μια φιάλη , χωρίζουν το περιεχόμενό του σε δύο ή περισσότερα πρόσθετα αυτά .
Η
εικόνων