Διαφορά μεταξύ Βόρειας &? Southern κηλίδωση

Βιολογία είναι μια πρόκληση για πολλούς λόγους . Ένας από τους λόγους είναι η δυσκολία στη μελέτη μακρομορίων --- μόρια που περιέχουν εκατοντάδες ή χιλιάδες των μικρότερων μοριακών μονάδων αρμαθιές μαζί . Εάν μόνο μία ή δύο από τις μικρότερες μοριακές μονάδες ανταλλαχθούν έξω , τα μακρομόρια να αλλάξετε τις ιδιότητές τους . Βιολόγοι πρέπει να μετρηθεί με κάποιο τρόπο πολύ μικρές αλλαγές σε ένα πολύ μεγάλο μόριο . Φυσικά , " μεγάλη " δεν σημαίνει αρκετό για να χειριστεί ή να δείτε μεγάλη , ώστε οι βιολόγοι χρειάζονται ειδικά εργαλεία για να κάνει τέτοιες μετρήσεις . Το αποτύπωμα είναι ένα από αυτά τα εργαλεία . Gel ηλεκτροφόρηση
Η

Όλες οι τεχνικές λέκιασμα ξεκινήσει με ηλεκτροφόρηση γέλης . Η πηκτή είναι περισσότερο ή λιγότερο σαν ένα λεπτό ορθογώνιο ζελατίνης . Ένα μικρό ποσό από ένα ειδικά προετοιμασμένο βιολογικά μόρια τίθεται επί της γέλης στο ένα άκρο, στη συνέχεια, ένα ηλεκτρικό πεδίο εφαρμόζεται από το ένα άκρο στο άλλο . Τα παρασκευασμένα μόρια είναι ηλεκτρικά φορτισμένα , έτσι ώστε το ηλεκτρικό πεδίο τους τραβά μέσω της γέλης . Κινούνται αργά μέσα από το παχύ gel έως ότου το πεδίο είναι απενεργοποιημένο . Τα ελαφρύτερα μόρια παίρνουν τράβηξε πιο γρήγορα και να προχωρήσουμε περαιτέρω , τα βαρύτερα μόρια χρειάζονται περισσότερο χρόνο για να προχωρήσουμε , έτσι ώστε να μην το κάνει ως τώρα .
Εικόνων Χρησιμοποιώντας Τζελ
Η

Στην πράξη , Τα πολλά διαφορετικά δείγματα βάλει κάτω απλώνονται κατά μήκος ενός άκρου του πηκτώματος . Μετά εφαρμόζεται το ηλεκτρικό πεδίο , τα διάφορα δείγματα απλώνονται κατευθύνονται προς το αντίθετο άκρο του πηκτώματος . Η εξάπλωση του κάθε δείγματος ονομάζεται " λωρίδα ". Η λωρίδα θα έχει συνήθως μερικές διαφορετικές ζώνες που αντιστοιχούν σε μόρια διαφορετικά βάρη σε κάθε δείγμα . Υπάρχουν αρκετοί διαφορετικοί τρόποι για να καταστεί οι ζώνες ορατές. Αναλύοντας το τζελ δίνει βιολόγοι μια ιδέα του μεγέθους των διαφόρων μορίων , αλλά για να πάρετε περισσότερες πληροφορίες , μια διαφορετική μέθοδος είναι απαραίτητη . Αυτός είναι όπου κηλίδωση έρχεται σε . Εικόνων
κηλίδωση
Η

Η κηλίδωση είναι ένας τρόπος να πάρουμε τα μόρια που έχουν εξαπλωθεί πέρα στη γέλη και η διάθεσή τους για περισσότερα ανάλυση . Με τον ίδιο τρόπο στυπόχαρτο απορροφήσει χαλαρά μελάνι --- ή έκαναν τις ημέρες όταν οι λαοί που χρησιμοποιούνται πένες --- βιολογική κηλίδωση " απορροφήσει " τα μόρια από το τζελ σε ένα διαφορετικό υλικό . Τα μόρια καταλήγουν στο ίδιο μοτίβο , αλλά τώρα σε ένα ειδικό χαρτί ή πλαστικό φύλλο . Τα μόρια παίρνουν συνδεδεμένο με το φύλλο , ώστε να μην μετακινούνται πια , και τότε μπορούν να εμβαπτίζονται σε ένα διάλυμα από άλλα μόρια ανιχνευτή που παρέχουν περισσότερες πληροφορίες σχετικά με τα μόρια . Υπάρχουν αρκετοί διαφορετικοί τρόποι για να κάνει αυτά τα βήματα , αλλά η αρχή είναι η ίδια για όλα αυτά .
Εικόνων Νότια , Βόρεια και Δυτική κηλίδωση
Η

Βιολόγος Edwin Southern ήταν η πρώτα να αναπτυχθεί μια τεχνική στύπωσης . Ανέπτυξε όλα τα στοιχεία που είναι αναγκαία για να είναι σίγουροι ότι η ηλεκτροφόρηση γέλης DNA θα μπορούσε να μεταφερθεί και να μετρηθεί σε λέκιασμα υλικό με ακρίβεια . Η μέθοδος αυτή πήρε το όνομά του : Southern κηλίδωση . Άλλοι επιστήμονες βρει τον τρόπο να κάνει την ίδια γενική τεχνική εργασία για το RNA , και --- σε τυπικό διασκέδαση - αγαπώντας στυλ επιστήμονας --- ονομάζεται αναλυτική μέθοδο τους κηλίδωση Northern . Αργότερα, η διαδικασία τροποποιήθηκε για τη μέτρηση των πρωτεϊνών , και ονομαζόταν κηλίδωση Western. Και οι τρεις τεχνικές που χρησιμοποιούν τις ίδιες αρχές : . Νότια μέτρα DNA , Βόρεια μέτρα RNA , Western μέτρα πρωτεΐνες εικόνων