The Beer - Lambert νόμο , που ορίζει ότι η απορρόφηση είναι ανάλογη ή έχει μια γραμμική σχέση, η συγκέντρωση των σωματιδίων απορροφήσεως , ισχύει μόνο για τις οπτικές πυκνότητες κάτω από 0,4 . Ωστόσο , τα δείγματα με οπτικές πυκνότητες υψηλότερες από 0,4 μπορεί να αραιωθεί με ένα καθορισμένο συντελεστή αραίωσης και οπτικές πυκνότητες τους μετριέται . Εάν οι μετρούμενες τιμές διαιρούνται με τον παράγοντα αραίωσης , για να παραχθεί το διορθωμένη οπτική πυκνότητα, η νέα αυτή τιμή είναι ανάλογη προς τον αριθμό των κυττάρων στο δείγμα.
Εικόνων Φασματοφωτόμετρο
Η
η οπτική πυκνότητα μετράται με ένα όργανο , που είναι γνωστή ως ένα φασματοφωτόμετρο , το οποίο συγκρίνει τη φωτεινότητα του φωτός που εκπέμπεται από δύο πηγές , ένα από τα οποία έχει ορισμένες τυποποιημένες χαρακτηριστικά. Καθώς το φως περνά μέσα από ένα κυτταρικό εναιώρημα , το φως σκεδάζεται από τα κύτταρα , έτσι ώστε λιγότερο από αυτό φθάνει ένα φωτοηλεκτρικό κύτταρο - μια ηλεκτρονική συσκευή του οποίου η ηλεκτρική έξοδος ποικίλλει ανάλογα με τη δύναμη του φωτός που πέφτει πάνω του - μέσα στο φασματοφωτόμετρο. Έτσι , όσο υψηλότερος είναι ο αριθμός των κυττάρων στο εναιώρημα το ασθενέστερο το ηλεκτρικό σήμα εξόδου του φωτοηλεκτρικού κυττάρου και το αντίστροφο .
Η οπτική πυκνότητα Διόρθωση
Η
Στο οπτικό πυκνότητες πάνω από 0,4 , τα πτυχία στους οποίους τα κύτταρα μπορεί να επισκιαστεί από άλλα κύτταρα ή αντανακλούν το φως πολλές φορές είναι αισθητή . Σε υψηλότερες οπτικές πυκνότητες , η μη διορθωμένη οπτική πυκνότητα των κυτταρικών εναιωρημάτων δεν είναι πλέον ευθέως ανάλογη προς τον αριθμό των κυττάρων . Ωστόσο , η μη διορθωμένη οπτική πυκνότητα αραιών αιωρημάτων κυττάρων είναι σχεδόν ανάλογη με ακρίβεια γνωστή σχετικές πυκνότητες τους - η αναλογία των πυκνοτήτων τους με εκείνη της ουσίας αναφοράς , όπως το νερό - έτσι είναι μια λογική υπόθεση εργασίας ότι η μη διορθωμένη οπτική πυκνότητα ενός ιδιαίτερα αραιό εναιώρημα των κυττάρων είναι, στην πραγματικότητα , αληθινή οπτική πυκνότητα του.
εικόνων σχετική οπτική πυκνότητα
Η
πολλαπλασιάζοντας τη σχετική αξία πυκνότητα κάθε κυτταρικό εναιώρημα από το βασικό οπτικής πυκνότητος τιμή που λαμβάνεται από την εξαιρετικά αραιό εναιώρημα των κυττάρων , είναι δυνατόν να ληφθεί η διορθωμένη οπτική πυκνότητα . Ωστόσο , για να κάνει τη μέτρηση όσο το δυνατόν ακριβέστερες , η βασική τιμή της οπτικής πυκνότητας θα πρέπει να λαμβάνονται από πολλαπλές αναγνώσεις φασματοφωτόμετρο .
Η
εικόνων